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解毒護肝方經(jīng)PPARs信號通路激

返回列表 來源:未知 發(fā)布日期:2019-11-29 09:41【

藥物性肝損傷(Drug-induced liver injury,DILI) 是指過量或不當使用藥物后,由其本身或代謝產(chǎn)物 引起的肝臟損傷。近年來 DILI 已成為嚴重威脅人類身 體健康的疾病之一。對乙酰氨基酚(acetaminophen, APAP)是臨床上常用的解熱鎮(zhèn)痛藥物,治療劑量下安 全有效,但長期大量使用或聯(lián)合用藥時易誘發(fā) DILI。近幾十年來,APAP 引起的急性肝損傷已經(jīng) 成為急性肝衰竭的主要原因 。

1 材料與方法

1.1 動物

Wistar 大鼠 60 只,雌雄各半,清潔級, 體質量(200±20)g,北京維通利華實驗動物技術有限 公司提供,動物許可證號:SCXK(京)2012-0001, 動物質量合格證號:11400700181914。

1.2 藥物與試劑

解毒護肝方,組方為柴胡 10 g、醋香附 15 g、炒白芍 15 g、五味子 10 g、黃芪 15 g、白 術 10 g、茵陳 15 g、黃芩 10 g、丹參 15 g、楮實子 10 g、生甘草 10 g,選用廣東一方制藥有限公司生產(chǎn) 的中藥配方顆粒劑,生產(chǎn)批號分別為:17070084、 17110018、16120149、17100125、18010046、17090124、 17060195、17120138、17110024、11080711、17120058, 用 100 ℃蒸餾水沖泡,將配制好的藥液置 4 ℃冰箱貯 存?zhèn)溆茫? 周配 1 次。水飛薊賓膠囊,天津天士力制 藥股份有限公司生產(chǎn),每粒含水飛薊賓 35 mg,生產(chǎn) 批號:750709172,批準文號:國藥準字 H20040299, 用蒸餾水配制,置 4 ℃冰箱貯存?zhèn)溆茫? 周配 1 次。 對乙酰氨基酚片,石藥集團歐意藥業(yè)有限公司生 產(chǎn) , 每 片 含 對 乙 酰 氨 基 酚 0.5 g, 生 產(chǎn) 批 號 : 016171002,批準文號:國藥準字 H13022763,用 40 ℃生理鹽水配制,將配制好的藥液置 4 ℃冰箱貯 存?zhèn)溆茫? 周配 1 次。 AST 試劑盒(批號:AUZ3645)、ALT 試劑盒(批 號:AUZ3689),貝克曼庫爾特實驗系統(tǒng)有限公司; TP 試劑盒(批號:120441)、ALB 試劑盒(批號: 131311),中生北控生物科技股份有限公司;DBIL 試 劑盒(批號:A006),長春匯力生物技術有限公司; Rat IL-6 試劑盒(批號:BE45361)、Rat TNFα 試劑 盒(批號:BE45471),德國 IBL International GmbH 公司;Rat 5-LOX 試劑盒(批號:SEB355Ra),武漢云 克隆科技股份有限公司;白三烯 B4 試劑盒(批號: 520111), 美 國 Cayman Chemical Company 公 司 ;Trizol (批 號 : 139603), 美 國 Invitrogen 公 司 ; TIANScript cDNA 第 一 鏈 合 成 試 劑 盒( 批 號 : P5011)、 SuperReal PreMix Plus(SYBR Green)(批 號:Q5922),天根生化科技(北京)有限公司;氯 仿、異丙醇、無水乙醇,天津市永大化學試劑有限 公司等。

1.3 儀器

Humalyzer2000 半自動生化儀,德國豪邁 公 司 ; DP73 數(shù) 碼 顯 微 鏡 , 日 本 Olympus 公 司 ; HMIAS-2000 顯微圖像分析系統(tǒng),武漢同濟醫(yī)科大 學;756MC 型紫外-可見分光光度計,上海精密科學 儀器有限公司;ELx800 酶標儀,美國 BIO-TEK 公 司;HH · W21 · 600 型電熱恒溫水箱,余姚市東方 電工儀器廠;MDF-382E 型超低溫保存箱,日本 SANYO 公司;1- 15K 型高速冷凍離心機,美國 Sigma 公司;其林貝爾QL-902 渦旋振蕩儀,海門市其林貝爾儀器制造有限公司;石蠟切片機(Leica)、熒光定量 PCR 儀 ABI7500,美國 Applied Biosystems 公司等。

2 結果

2.1 一般情況觀察

正常組大鼠毛發(fā)滑順,有光澤, 精神狀態(tài)良好,行動靈活,二便正常。與正常組比 較,模型組大鼠體質量減輕,毛發(fā)無光澤,精神狀 態(tài)欠佳,喜臥;解毒護肝方和陽性藥組大鼠能不同 程度地改善大鼠的毛發(fā)光澤度、精神狀態(tài)、體質量 以及行動靈活性等情況。給予對乙酰氨基酚造模 前,經(jīng)統(tǒng)計各組大鼠體質量差異均無統(tǒng)計學意義 (P > 0.05);造模及給藥 8 d 各組大鼠體質量差異亦 無統(tǒng)計學意義(P > 0.05);造模及給藥 15 d,模型 組、陽性藥組、復方高劑量組的大鼠體質量已有降 低趨勢(P > 0.05)。

2.2 解毒護肝方對肝損傷大鼠肝功能的影響

與正常 組比較,模型組大鼠血清 AST、ALT、ALB 和 DBIL 含量明顯升高(P<0.05,P<0.01),提示肝損傷模型 復制成功。與模型組比較,復方低、中劑量組能顯著降低大鼠血清 AST、ALT 活性(P<0.05,P<0.01);復方低劑量組顯著降低 DBIL 含量(P<0.05); 復方 高劑量組對血清 AST、ALT 活性和 ALB 含量有降低 趨勢,但差異無統(tǒng)計學意義(P > 0.05);陽性藥組能 明顯降低大鼠血清 AST、ALT 活性和 ALB 含量(P< 0.05)。表明解毒護肝方能有效地改善 APAP 所致肝 損傷大鼠的肝功能。

3 討論

中醫(yī)無“藥物性肝損傷”之病名,據(jù)臨床表現(xiàn)可 將其歸為“黃疸”“積聚”“脅痛”“藥物毒”等范 疇,常見的臨床證型有肝郁脾虛證、肝腎陰虛證、 氣滯血瘀證、濕熱蘊結證、熱毒熾盛證五種,應辨 證施治。本課題組認為本病的發(fā)生多由短期過量用 藥、藥毒過猛或長期用藥、藥毒蓄積,導致肝體受 損,肝失疏泄,氣機不暢或血絡瘀滯;木遏則土 壅,土壅則脾失健運,而致濕濁內生,濕蘊而化 熱。因此,肝脾失調、濕熱毒瘀為其主要病機,疏 肝健脾、理氣活血、除濕解毒為有效治法。解毒護 肝方是在逍遙丸、小柴胡湯、茵陳蒿湯三方基礎上 化裁而成,方中柴胡、香附疏肝解郁、條達肝氣, 為君藥;炒白芍、五味子養(yǎng)陰柔肝,黃芪、炒白術 健脾益氣,共為臣藥;黃芩、茵陳清熱除濕,楮實子益腎清肝,丹參清熱涼血、活血祛瘀,共為佐 藥;生甘草清熱解毒,并能調和諸藥,為使藥。諸 藥合用,共奏疏肝健脾、解毒除濕、活血祛瘀之功。



 


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