熒光增白劑( FWAs) 是一種熒光染料，或稱為白色染料，是一類復(fù)雜的有機化合物，其特性是激發(fā) 入射光線產(chǎn)生熒光，使所染物質(zhì)獲得類似熒石的效應(yīng)，使肉眼看到的物質(zhì)顏色很白，從而起到增白的作用，被廣泛用于造紙、塑料、皮革、紡織、洗滌等行業(yè)。

1 實驗部分

1. 1 儀器與試劑

6460 三重四極桿液質(zhì)聯(lián)用儀( 美國安捷倫公司) ; 5810Ｒ 冷凍離心機( 德國艾本德股份公司) ; Ｒ － 12 平行溶劑濃縮蒸發(fā)儀( 瑞士步琦有限公司) ; VOＲTEX KB － 3 渦旋振蕩器( 中國海門其林貝爾儀器制 造有限公司) ，MS105DU 電子天平( 美國梅特勒公司) 。 10 種熒光增白劑標(biāo)準(zhǔn)品: C. I. 393( 純度≥99. 7% ) 、C. I. 135( 純度≥99. 8% ) 、C. I. 185( 純度≥ 98. 1% ) 、C. I. 367( 純度≥99. 9% ) 、C. I. 162( 純度≥95% ) 、C. I. 368( 純度≥97. 9% ) 購于上海安譜公 司; C. I. 71( 146 μg /mL) 、C. I. 113( 108 μg /mL) 、C. I. 353( 103 μg /mL) 、C. I. 220( 101 μg /mL) 為購于 福州綠川生物科技有限公司的混合對照品。甲醇、乙腈( 色譜純，Merck 公司) ，PSA、C18 ( Welch 公 司) 。

1. 2 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制

準(zhǔn)確稱取 10 種 FWAs 標(biāo) 準(zhǔn) 品，配成質(zhì)量濃度為 1 mg /mL 的 標(biāo) 準(zhǔn) 儲 備 液 ( C. I. 367、C. I. 393、 C. I. 368 用三氯甲烷溶解，C. I. 135、C. I. 185、C. I. 162、C. I. 71、C. I. 113、C. I. 353、C. I. 220 用乙腈 溶解) ，于 － 18 ℃冰箱中避光保存。 采用基質(zhì)加標(biāo)法配制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線溶液，分別移取 10 種熒光增白劑標(biāo)準(zhǔn)儲備液適量于 50 mL 棕色 容量 瓶 中，用 乙 腈 配 成 C. I. 393、C. I. 368 質(zhì) 量 濃 度 為 1 μg /mL，C. I. 135、C. I. 185、C. I. 367、 C. I. 162 質(zhì)量濃度為 100 ng /mL，C. I. 71、C. I. 113、C. I. 353、C. I. 220 質(zhì)量濃度為 50 μg /mL 的混合標(biāo) 準(zhǔn)中間液; 稱取與試樣基質(zhì)相應(yīng)的陰性樣品，加入混合標(biāo)準(zhǔn)中間液適量，與樣品同步進行提取和凈化。

1. 3 樣品前處理

通過紫外燈照射發(fā)現(xiàn)，多數(shù)熒光增白劑吸附于面貼膜的載體( 基膜) ，故將面貼膜的載體( 基膜) 作 為研究對象，將其剪成 5 mm × 5 mm 大小見方，混合均勻。準(zhǔn)確稱取上述樣品 2. 0 g( 精確至 0. 01 g) 置 于 50 mL 具塞比色管中，加入 10 mL 水和 10 mL 乙腈，再加入 2. 0 g NaCl 和 4. 0 g 無水 MgSO4，渦旋振 蕩 5 min，以0 ℃ 12 000 r/min 離心5 min，上層清液轉(zhuǎn)移至已提前放入200 mg C18、600 mg PSA 的離心管 中，渦旋振蕩 5 min，以 0 ℃ 12 000 r/min 離心 5 min，上清液移至玻璃管中，于 40 ℃平衡定量濃縮儀中 濃縮至近干。殘留物加 1. 0 mL 乙腈渦旋溶解，過 0. 22 μm 濾膜，待高效液相色譜 － 串聯(lián)質(zhì)譜儀測定。

1. 4 色譜 － 質(zhì)譜條件

色譜條件: SB － C18 ( 2. 1 mm × 100 mm，1. 8 μm) 色譜柱; 柱溫: 35 ℃ ; 進樣量: 5 μL; 流速: 0. 3 mL /min; 流動相: A 為 10 mmol /L 乙酸銨溶液，B 為乙腈。梯度洗脫程序: 0 ～ 1. 0 min，90% A; 1. 0 ～ 2. 0 min，90%～ 50% A; 2. 0 ～ 4. 0 min，50% ～ 10% A; 4. 0 ～ 6. 0 min，10% A; 6. 0 ～ 8. 0 min， 10%～ 90% A; 8. 0 ～ 10. 0 min，90% A。 質(zhì)譜條件: 電噴霧離子( ESI) 源; 多反應(yīng)監(jiān)測( MＲM) 模式檢測; 霧化氣溫度: 325 ℃ ; 霧化器流 速: 6 L /min，噴霧電壓: 45 psi; 鞘氣溫度: 350 ℃ ; 鞘氣流速: 12 L /min。其余質(zhì)譜參數(shù)見表 1。


2 結(jié)果與討論

在相同色譜條件下對比安捷倫 SB － C18 ( 2. 1 mm ×100 mm，1. 8 μm) 和資生堂 MGⅢ( 2. 0 mm × 100 mm，3 μm) 2 種色譜柱對 10 種熒光增白劑的 分離效果。結(jié)果表明，4 種負離子掃描模式下的熒 光增 白 劑( C. I. 73、C. I. 113、C. I. 353、C. I. 220) 在 2 種色譜柱上均能實現(xiàn)基線分離，分離度良好; 6 種正離子掃描模式的熒光增白劑 ( C. I. 162、 C. I. 367、C. I. 393、C. I. 185、C. I. 135 和 C. I. 368) 在 MGⅢ色譜柱上不能完全分離，其中 C. I. 367 和 C. I. 393、C. I. 185 和 C. I. 135 難以實現(xiàn)基線分 離; 而 SB － C18色譜柱對此 6 種熒光增白劑均有 較好的保留特性( 圖 1) 。

分別比較了 10 mmol /L 乙酸銨 － 乙腈、0. 1% 甲酸溶液 － 乙腈和水 － 乙腈 3 種流動相體系梯度洗脫 對 10 種熒光增白劑響應(yīng)值和分離度的影響。結(jié)果顯示，以 0. 1% 甲酸溶液 － 乙腈梯度洗脫時的響應(yīng)值 較低，以水 － 乙腈梯度洗脫時，10 種熒光增白劑的響應(yīng)值和分離度均不佳; 而采用 10 mmol /L 乙酸 銨 － 乙腈進行梯度洗脫，10 種熒光增白劑的響應(yīng)值顯著增加，峰形和分離度均得到顯著改善，因此選 擇 10 mmol /L 乙酸銨 － 乙腈作為流動相進行梯度洗脫。

3 結(jié) 論

本研究采用 QuEChEＲS 技術(shù)結(jié)合三 重四極桿液質(zhì)聯(lián)用儀，對面膜中 10 種熒 光增白劑進行分析檢測，可在 10 min 內(nèi) 完成 10 種熒光增白劑的有效分離。方法具有穩(wěn)定性好、靈敏度高、特異性強、定性定量準(zhǔn)確度高等特 點，適用于面膜中熒光增白劑的檢測，可為化妝品中熒光增白劑檢驗標(biāo)準(zhǔn)的制定提供依據(jù)。